Метод основан на способности атипичных микобактерий 4 группы (быстрорастущих) расти на среде с 5% NaCl. Помимо этой группы, на этой среде растут только М. triviale(3 группа) и М. flavescens (2 группа). Все остальные микобактерии, в том числе М. tuberculosis и М. bovis, на этих средах не растут.
Для отличия микобактерий туберкулеза от других микобактерий, а также для отличия М. tuberculosisот М. bovisпроводят следующие определения: 1) содержание ниацина или рост в присутствии с ТКГ, 2) никотинамидазной активности, 3) нитратредуктазной активности, 4) каталазой и пероксидазной активности.
Наиболее показательными для дифференциации микобактерий являются следующие культуральные и биохимические тесты: температурный оптимум и скорость роста, определение пигментообразования в темноте и на свету, рост в присутствии салицилового кислого натрия, тиофенкарбонил гидразида, хлорида натрия, изониазида, нитратредуктазная активность, пиразинамидазная и уреазная активности, термостабильная каталазная активность, гидролиз ТВИН 80.
Вырастают в темноте беспигментными (в термостате) в течение 3-6 недель, но после освещения дневным или электрическим светом приобретают пигмент желтого или желто-оранжевого цвета. К ним относятся: М. kansasii, М. simiае, М. balnеi. Наибольшее значение в легочной диагностике имеют М. kansasii.
Микобактерии бычьего вида в отличие от М. tuberculosis, хуже растут на яичных средах. Концентрация глицерина в среде более чем 0,75% влияет отрицательно на скорость размножения микобактерий бычьего вида. Они дают рост первичных культур на 30-45-60-й день в виде мелких гладких, влажных колоний. При пассажах рост наблюдается на 14—21-й день. Колонии не имеют пигмента, они белого или сероватого цвета.
В современной бактериологии идентификация микобактерий представляет большие трудности. С одной стороны, в результате интенсивной и длительной химиотерапии туберкулеза изменилась морфология возбудителя туберкулеза.
В процессе определения лекарственной чувствительности проводят первичную идентификацию выделенных культур. Комплект питательных сред, для определения лекарственной чувствительности МБТ, обязательно содержит: среду с салициловокислым натрием (1000 мкг/мл), комбинированную среду с ТСН (2 тиофен-карбоксил-гидраздид) и KNO3 (или NaNo3 -1 мкг/мл).
Кроме описанных выше классических методов микробиологической диагностики туберкулеза в настоящее время широкое применение нашли системы ВАСТЕС-460 ТВ и МGIТ с использованием бульонных сред. Системы используются не только для культуральной диагностики микобактерий, но и для определения лекарственной чувствительности к основным противотуберкулезным препаратам.
Определение лекарственной чувствительности методом пропорций широко применяется в Европе. Метод основал на определение процента устойчивой популяции микобактерий туберкулеза к антибактериальным препаратам. Подсчет % устойчивых микобактерий, проводят путем сравнения количества выросших колоний МБТ в контрольной пробирке (без препарата) и в пробирке с абсолютной концентрацией препарата.
Для определения лекарственной чувствительности выделенных культур МБТ в России широко используют метод абсолютных концентраций.
Туберкулез – инфекционное заболевание, возбудитель туберкулеза – туберкулезная палочка – принадлежит к роду mycobacterium tuberculosis. В настоящее время выделяют 4 основных разновидности туберкулеза, способных вызывать заболевания человека и теплокровных животных – человеческий, бычий, птичий и мышиный. Человек восприимчив приемущественно к первым двум типам микобактерий туберкулеза. Заражение туберкулезом может быть вызвано микобактериями туберкулеза, выделяемыми не только с мокротой больного, но и с гноем, мочой, калом. В отдельных случаях заражение может произойти и от больных туберкулезом животных, в первую очередь от крупного рогатого скота. Возможное заражение туберкулезом зависит от многих причин: количества выделяемых больным микобактерий, тесноты и длительности контакта, соблюдение мер индивидуальной профилактики, предшествующего состояния здоровья, состояния защитных сил организма и др. Антисанитарные бытовые привычки (употребление общей посуды, общей зубной щетки и других предметов личной гигиены) способствуют распространению туберкулезной инфекции. Симптомы туберкулеза: умеренное повышение температуры тела, быстрая утомляемость, слабость. Наряду с общими симптомами болезни отмечается кашель сухой или со скудным выделением мокроты. Единственный метод, позволяющий выявить начальное туберкулезное изменение легких – профилактическая флюорография.